关于PAL(苯丙氨酸解氨酶)活性测定,遇到障碍了!
园艺学院的大虾们:本人实在郁闷得不行了!希望熟悉植物材料苯丙氨酸解氨酶活力测定的高手指点一下……
在37摄氏度水浴保温条件下反应0.5小时,于290nm下测反应前后的吸光值,为什么反应后的吸光值反而更小???例如:0min吸光值为1.164,30min后吸光值为1.134,反应2h,5h.........直到10小时后才有小升。不是说生成反式肉桂酸在290nm下有强吸收么,那么如果该材料中PAL没有活力的话也不至于吸光值减小吧,难道是逆反应?我的反应条件pH8.8而且不会有大量的NH3存在呀,所以郁闷!忘记说了,我以1mL 0.02mol/L的L -Phe和1mL纯净水和2mL 0.05mol/L pH8.8硼酸缓冲液为空白调零,岛津DU-1700分光光度计。
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