我爱短发

如果 loxP位点位于两个染色体上应该会发生基因融合，但是重组方向如何呢？这个问题搞不清楚，希望高人指点！
郭老师看到的话也给说说！  无尽感谢.......


最近的实验因此不能前进，处于瓶颈期！
郁闷中.................

K!nasE

我当时的分子生物学课专门讲过Cre这个位点特异性重组酶, 你根据它的特性自己应该能推出来重组方向, 同学别把学的东西扔了啊, 分子生物学的基础知识做实验的时候是要用到好多的

我爱短发

引用:

原帖由 K!nasE 于 2008-4-30 07:49 发表
我当时的分子生物学课专门讲过Cre这个位点特异性重组酶, 你根据它的特性自己应该能推出来重组方向, 同学别把学的东西扔了啊, 分子生物学的基础知识做实验的时候是要用到好多的

我画过了，附件里就是我的思路。但是设计引物检测之后大小不对。这里使用的是一个UPS（univector plasmid-fusion syetem），就是利用了cre/loxP的特性。所以设计引物的时候很注意，两个primer分别位于两个载体上。方向什么的也都确认过了，没有什么问题了。但是结果就是
重组之后能在Kan板上筛选出来，PCR检测之后大小就出问题了，好像都是750bp。
头疼死了

K!nasE

引物的位置再核对一次

我爱短发

今天下午重新把44组PCR了一次，连昨天出来的750bp都没有了！看来引物方向的确有问题。
这个5.1没得过了

举止优雅的猪

不做试验的人在偷偷的乐........^_^

我爱短发

引用:

原帖由 举止优雅的猪 于 2008-5-3 09:35 发表
不做试验的人在偷偷的乐........^_^

天呢，没有天理！
不给想解决的办法就不说了，还在一边幸灾乐祸
知道的话给帮帮忙了！在此谢过.......

举止优雅的猪

引用:

原帖由 我爱短发 于 2008-5-3 11:06 发表

天呢，没有天理！
不给想解决的办法就不说了，还在一边幸灾乐祸
知道的话给帮帮忙了！在此谢过.......

五一骑车去杭州玩～^_^
200多公里呢

我爱短发

引用:

原帖由 举止优雅的猪 于 2008-5-3 19:02 发表

五一骑车去杭州玩～^_^
200多公里呢

呵呵，昨天我也去杭州玩儿了，只不过是老板开车带我们过去的。
景色不错，就是人太多。还不如去吃小吃呢！

举止优雅的猪

引用:

原帖由 我爱短发 于 2008-5-3 20:05 发表

呵呵，昨天我也去杭州玩儿了，只不过是老板开车带我们过去的。
景色不错，就是人太多。还不如去吃小吃呢！

老板很人性化啊～我骑车起了将近两天才到杭州，累得都快疯掉了～